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猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 张福良 1 ; 靳玉芬 1 ; 郝贵增 1 ; 宋长绪 2 ; 朱道中 3 ;

作者机构: 1.安阳工学院

2.广东省农业科学院兽医研究所

3.广州出入境检验检疫局

关键词: 猪圆环病毒2型;实时荧光定量PCR;模板

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2007 年 37 卷 01 期

页码: 49-53

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。

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