文献类型： 中文期刊

作者： 冉云伟 ¹ ; 张改平 ² ; 刘运超 ² ; 陈玉梅 ² ; 王聚财 ² ; 孟凤丽 ² ; 王爱萍 ³ ;

作者机构： 1.郑州大学生命科学学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.;郑州大学生命科学学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

3.;郑州大学生命科学学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

关键词： 人乳头瘤病毒58亚型;截短型L1蛋白;伴侣分子pTf16

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2017 年 03 期

页码： 295-300

摘要： 目的:采用分子伴侣pTf16共表达的形式促进截短型人乳头瘤病毒(HPV)58亚型L1蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达。方法:将重组表达质粒pGEX-6P-HPV58-L1转入含有分子伴侣pTf16的大肠杆菌BL21感受态细胞中,在2.0 mg/mL L-阿拉伯糖诱导表达20 min之后加入1.0 mmol/L的IPTG,18℃诱导表达24 h,使目的蛋白与伴侣蛋白共表达;重组蛋白经GST亲和纯化后去除GST标签免疫昆明鼠,ELISA检测免疫血清效价。结果:分子伴侣pTf16能显著提高目的蛋白的可溶性表达,经纯化及去除GST标签,用SDS-PAGE与Western印迹检测,约在相对分子质量50×103处出现特异性反应条带,该条带与截短型HPV58 L1蛋白预期大小相符,免疫动物后经ELISA检测小鼠血清的抗体效价为1∶6400。结论:获得了截短型HPV58 L1蛋白,动物免疫试验证实该蛋白具有较好的免疫原性,为进一步研制HPV58预防型疫苗奠定了基础。