文献类型： 中文期刊

作者： 张伟 ¹ ; 王世银 ¹ ; 邓双义 ¹ ; 杨力伟 ¹ ; 刘晓娜 ¹ ; 石国庆 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农业职业技术学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所省部共建绵羊遗传改良与健康养殖重点实验室

关键词： 巴什拜羊;骨骼肌;卫星细胞;诱导分化;增殖能力

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2019 年 01 期

页码： 82-88

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。