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猪ZBED6基因有效突变位点的筛选与验证

文献类型: 中文期刊

作者: 张冬杰 1 ; 汪亮 1 ; 李忠秋 1 ; 刘娣 1 ;

作者机构: 1.黑龙江省农业科学院畜牧研究所;农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室

关键词: 猪;ZBED6基因;荧光信号;CRISPR-Cas9技术

期刊名称: 中国畜牧杂志

ISSN: 0258-7033

年卷期: 2017 年 53 卷 08 期

页码: 34-37+43

收录情况: 北大核心

摘要: 锌指蛋白ZBED6基因的突变可促进骨骼肌中胰岛素样生长因子2(IGF2)转录水平显著上调,从而促进细胞增殖和肌管形成。本研究利用CRISPR-Cas9技术对猪的ZBED6基因进行编辑,利用在线软件筛选出4个突变靶点,利用p Cas9/g RNA载体构建p Cas9/g RNA-ZBED6质粒,再构建4个用于验证突变效率的p TYNE-ZBED6质粒,同时转染HEK293细胞系,通过观察荧光信号的强弱判断靶序列突变效率的高低。结果表明:位于编码区第17~37位点的靶点1转染后荧光信号最强,切割效率最高,该位点是利用CRISPR-Cas9技术编辑ZBED6基因的有效位点。

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