您好，欢迎访问上海市农业科学院 机构知识库！
上海市农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

节瓜ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 杜旋 1 ; 刘娜 1 ; 鲁博 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院设施园艺研究所上海市设施园艺技术重点实验室;上海市农业科学院农业科技信息研究所

关键词： 节瓜(Benincasa hispida Cogn. var. chieh-qua How.);ISSR-PCR;正交设计;引物筛选;退火温度

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2019 年 23 期

页码： 7794-7800

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探索适用于节瓜ISSR-PCR反应的反应体系以及得到适用于该体系的ISSR引物,首先利用正交实验的方法对节瓜ISSR-PCR反应体系的三因素(模板, 2×san Taq PCR mix预混液,引物)的工作浓度进行优化。然后依据Tm值的差异将引物分成了三组,每组分别设定不同的退火温度,以节瓜基因组DNA为模板进行PCR扩增,经2%琼脂糖凝胶电泳和UVP成像,结果表明,第二组引物扩增条带的数目、清晰度明显优于第一组和第三组的引物扩增的条带,第二组45℃退火条件下的扩增情况明显优于在40℃退火条件下的扩增。因此,通过实验与分析,确定了节瓜ISSR-PCR反应体系是DNA模板(50 ng/μL) 2μL、2×san Taq PCR mix预混液10μL、引物(10μmol/L) 1μL,筛选到了18条适合在节瓜的ISSR-PCR反应中应用的引物,其最适合的退火温度是45℃。

  • 相关文献

[1]喜马拉雅樱花嫩茎离体快繁体系优化. 李水根,李秀芬,殷丽青,高晨,朱建军. 2020

[2]真姬菇菌种质量评价方法的优化研究. 陈辉,刘洋,赵楚楚,于海龙,张津京,冯志勇. 2013

[3]朱顶红SRAP-PCR反应体系的建立和优化. 孙翊,张永春,殷丽青,杨柳燕,李心,费如桂. 2017

[4]正交设计优化菜薹ISSR反应体系研究. 冒维维,马金骏,薄天岳,高红胜,陈学好. 2006

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：上海市农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台