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猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 周宏专 1 ; 覃湘婕 1 ; 杨兵 1 ; 徐福洲 1 ; 满坤 1 ; 苏霞 1 ; 张晓东 2 ; 刘爵 1 ; 罗绪刚 3 ; 王金洛 1 ;

作者机构: 1.北京市农林科学院

2.北京农业生物技术研究中心

3.中国农业科学院

关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;S基因;原核表达;反应原性

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2014 年 29 卷 06 期

页码: 63-67

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过原核表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因不同编码区,以鉴定不同编码区表达产物与TGEV抗体的结合能力。在对TGEV S蛋白抗原位点分析的基础上,针对S蛋白N端的4个抗原位点C、B、D和A,设计引物分别扩增含C、B位点的TCB片段(411 bp)、含D位点的TD片段(441 bp)和含A位点的TA片段(456 bp),经克隆测序后分别插入原核表达载体p ET-32a中进行表达,SDS-PAGE电泳显示各片段均高效表达,表达的TCB片段、TD片段和TA片段融合蛋白大小分别为34.6,35.1,36.1 k Da。Western Blot结果表明,表达蛋白与TGEV感染猪阳性血清和His标签抗体均产生阳性反应。结果显示,3个S基因编码片段均具有与TGEV抗体结合的能力,为进一步鉴定不同编码区的免疫原性及抗原保护能力奠定了基础。

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