文献类型: 中文期刊
作者: 陈柳 1 ; 刘光清 1 ; 倪征 1 ; 余斌 1 ; 云涛 1 ; 华炯钢 1 ; 李双茂 1 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室
关键词: 兔出血症病毒;VP2;次要结构蛋白;细胞内定位
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2009 年 17 卷 02 期
页码: 1-7
摘要: 病毒蛋白VP2是兔出血症病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)的一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP2与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP2在细胞内的定位情况。首先在大肠杆菌中表达GST-VP2融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP2的抗血清。对制备的抗VP2抗血清进行特异性分析,再利用该抗体对转染pEGFP-VP2的BHK-21细胞进行检测,以研究VP2蛋白在细胞内的定位情况。结果表明,pEGFP-VP2转染BHK-21细胞后,不仅VP2蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断出VP2蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质。本研究成功构建了VP2与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP2主要在细胞质内表达并分布,为深入探讨VP2的生物学功能奠定了基础。
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