文献类型： 中文期刊

作者： 华炯钢 ¹ ; 朱寅初 ¹ ; 叶加林 ² ; 张存 ¹ ; 陈柳 ¹ ; 倪征 ¹ ; 付媛 ¹ ; 霍苏馨 ¹ ; 云涛 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所全省畜禽生物育种重点实验室农业农村部畜禽资源(家禽)评价利用重点实验室家禽种业与绿色养殖技术浙江省工程研究中心

2.杭州高级中学国际部

关键词： 鸡痘病毒;ORF127蛋白;间接ELISA;抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2025 年 37 卷 010 期

页码： 2057-2065

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立快速、准确的鸡痘病毒（fowlpox virus,FPV）抗体检测方法，将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于p ET-28a（+）原核表达载体，诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白，以纯化的蛋白作为包被抗原，通过优化各反应条件，建立检测FPV抗体的间接ELISA方法，经特异性、敏感性、重复性等试验和临床血清样本检测进行系统验证。结果显示，间接ELISA检测FPV抗体的最佳反应条件为:包被抗原质量浓度为10μg·m L^-1，待检血清稀释度为1∶100，酶标二抗稀释度为1∶25 000;特异性试验结果显示，除FPV阳性血清呈阳性反应外，与其他6种病毒（新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽腺病毒4型、火鸡疱疹病毒）的阳性血清均无交叉反应;敏感性结果显示，FPV阳性血清稀释800倍后检测结果仍为阳性;批内、批间重复试验结果显示，批内变异系数为1.81%～7.07%，批间变异系数为2.12%～7.16%，均小于10%。临床血清样品检测结果显示，180份血清样本总阳性率为79.4%（143/180）。上述结果表明，本研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性和稳定性好，可为免疫鸡群FPV抗体水平监测和FPV流行病学调查提供技术支撑。