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铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 刘伟 1 ; 朱修良 2 ; 李清海 2 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

2.浙江大学医学院附属第二医院放射科

关键词： Fth1;磁共振报告基因;慢病毒载体;大鼠骨髓间充质干细胞

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2017 年 33 卷 02 期

页码： 179-184

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至p Lenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,p Lenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响。

  • 相关文献

[1]一种高效制备慢病毒表达载体的方法. 于福先,陈晓宇,朱志伟,潘建治. 2011

[2]利用慢病毒载体制备转基因猪与鸡的方法学研究. 潘建治,朱志伟,于福先,陈晓宇. 2011

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