文献类型： 中文期刊

作者： 初建青 ¹ ; 王文艳 ² ; 房经贵 ² ; 张春华 ² ; 张彦平 ² ; 宋长年 ² ;

作者机构： 1.南京农业大学园艺学院

2.南京农业大学园艺学院;江苏省农业科学院园艺研究所

关键词： 葡萄;氮代谢;基因克隆;亚细胞定位;基因表达

期刊名称： 植物营养与肥料学报

ISSN： 1008-505X

年卷期： 2012 年 18 卷 02 期

页码： 405-416

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究利用VitisEST数据库中EST序列片段结合RT-PCR方法克隆了与氮代谢相关的硝酸盐还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和天冬酰胺合成酶(AS)的基因,并对它们进行亚细胞定位分析。同时,采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR法研究葡萄叶面喷施不同浓度尿素后5个基因的表达变化。结果表明,5个基因在葡萄幼叶中的表达水平显著高于老叶,说明叶面喷施尿素以喷布到幼叶对5个基因的表达水平影响显著;5个基因在不同时间段的表达水平差异不一致,但表达水平均高于对照,以0.3%和0.5%浓度的尿素对其影响明显;适当提高尿素水平既能提高氮代谢基因的表达水平,又能提高果实大小等果实指标,使其达到同步增加。喷施尿素6 h后,GS的表达量上升幅度明显高于其它基因,而NR在喷施尿素后48 h内一直保持着比较高的表达水平;NiR、AS表达量的变化趋势分别与NR、GS相一致,并且表现为NR﹥NiR,GS﹥AS。