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斑节对虾Toll9受体基因免疫功能的研究与表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘倩 1 ; 江世贵 1 ; 邱丽华 1 ; 黄建华 1 ; 周发林 1 ; 杨其彬 1 ; 姜松 1 ; 杨丽诗 1 ;

作者机构: 1.农业部南海渔业资源开发利用重点实验室

关键词: 斑节对虾;Toll受体蛋白;细胞免疫模型;TLR信号通路;微生物刺激;先天性免疫

期刊名称: 南方水产科学

ISSN: 2095-0780

年卷期: 2017 年 13 卷 05 期

页码: 63-71

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: Toll受体蛋白(Toll receptors)是一类重要的模式识别受体,在无脊椎动物先天性免疫系统中发挥重要作用。文章对斑节对虾(Penaeus monodon)新型Toll9受体基因(Pm Toll9)进行了研究:以人源胚胎肾细胞(HEK293T)成功构建体外细胞免疫模型,通过免疫印迹方法证实Pm Toll9重组真核蛋白可在HEK293T中成功表达。双荧光素酶报告系统检测发现在200 ng转染浓度处Pm Toll9对NF-κB报告基因的激活效果显著。q RT-PCR数据证明PmToll9成功激活HEK293T细胞Toll-like receptor(TLR)信号通路,促进通路下游髓样分化因子(My D88)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素(IL-10)的上调表达,同时酶联免疫吸附测定结果证明Pm Toll9可促进TNF-α蛋白表达水平显著上调。斑节对虾体内细菌刺激实验结果显示无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)可激活Pm Toll9在肝胰腺、肠、淋巴和鳃中的表达,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著抑制Pm Toll9在肝胰腺中的表达。提示无乳链球菌可通过Pm Toll9激活Toll信号通路,引起机体免疫防御反应,而哈维氏弧菌对此过程具有一定的抑制作用。

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