文献类型： 中文期刊

作者： 张雪寒 ¹ ; 何孔旺 ¹ ; 赵攀登 ¹ ; 栾晓婷 ¹ ; 叶青 ¹ ; 温立斌 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 周俊明 ¹ ; 李彬 ¹ ; 王小敏 ¹ ; 郭容利 ¹ ; 俞正玉 ¹ ; 茅爱华 ¹ ; 吕立新 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院院兽医研究所

关键词： 肠出血性大肠杆菌0157：H7;hly;stx;toxB;缺失株;小鼠;粘附;Enterohemorrhagic Escherichia coli 0157 ： H7 ; hly, stx, toxB gene ; Knockout strain ; Mouse ; Adherence

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2011 年 26 卷 005 期

页码： 76-82

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 肠出血性大肠杆菌(EnterohemorrhagicEscherichiacoli)0157:H7是食源感染的人兽共患病原菌.志贺毒素(Shigatoxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是0157:H7重要的毒力因子.选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,借助于sml0宿主菌获得0157:H7杂交菌株,通过同源重组,依次获得0157:H7(△hlyAstx△toxB)基因缺失株,△htyastx△toxB接种HEp-2细胞和感染链霉素处理的Balb/c小鼠,明确缺失株粘附定植的能力.经PCR鉴定,hly、stx和toxB基因分别被壮观霉素(Spc+)、庆大霉素(Gm+)和卡那霉素(Kan+)基因表达盒所代替,Westernblot鉴定结果显示,0157:H7(△hty△stx△toxB)检测不到相应的Stx、Hly和ToxB蛋白.0157:H7(△hlyastx△toxB)生长特性与亲本株无明显差异.对于HEp-2细胞的粘附能力明显降低.Balb/c小鼠排菌时间和排菌量明显减少和降低.本研究成功获得0157:H7(△hly△stxatoxB),并且明确Stx、Hly和ToxB的缺失导致了0157:H7对HEp-2细胞和Balb/c小鼠的粘附和定植能力降低.本研究旨在为研制EHEC0157:H7基因缺失疫苗奠定物质基础.