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芽胞杆菌菌体蛋白提取方法的比较

文献类型： 中文期刊

作者： 胡桂萍 1 ; 贾宪波 1 ; 刘波 2 ; 尤民生 1 ;

作者机构： 1.福建农林大学

2.福建省农业科学院

关键词： 芽胞杆菌;蛋白提取;破碎方法

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2013 年 05 期

页码： 698-701

摘要： 目的:比较不同破碎方法下3种芽胞杆菌菌体蛋白的提取效果。方法:以菊酯类农药降解菌巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌为研究对象,以裂解液为提取介质,分别采用超声波破碎法、水煮法和机械破碎法提取芽胞杆菌蛋白,并通过革兰染色电镜观察菌株破碎程度,用SDS-PAGE和Bradford法测定蛋白浓度。结果:革兰染色电镜观察发现玻璃珠机械破碎法对3种芽孢杆菌的细胞壁破碎程度最明显,其次为超声波破碎法,水煮法破碎效果不明显。SDS-PAGE和Bradford法测定结果表明,巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、弯曲芽胞杆菌经玻璃珠机械破碎后,提取的蛋白图谱条带清晰,丰度高,重复性好,含量分别为20.247、19.902和18.893 mg/mL;经超声波破碎提取的蛋白图谱条带较清晰,丰度一般,重复性不好,含量分别为10.572、9.438和10.424 mg/mL;经沸水浴破碎提取的蛋白图谱条带模糊,丰度低,重复性差,含量分别为1.366、1.119和1.136 mg/mL。结论:玻璃珠机械破碎法是破碎3种芽胞杆菌的最优方法,破碎后提取的蛋白含量高,条带清晰,重复性好。

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