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鲮生长激素CDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性

文献类型： 中文期刊

作者： 江世贵 1 ; 张殿昌 1 ; 苏天凤 1 ; 周发林 1 ; 吕俊霖 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

关键词： 鲮;生长激素;分子克隆;促生长活性

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2004 年 14 卷 006 期

页码： 23-27

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素CDNA 片段,克隆的MCGH全长567BP,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽.构建了表达载体PQE30-MCGH,转化大肠杆菌M15(PREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮MCGH在大肠杆菌中的高效表达,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32.13%,经WESTERN BLOTTING分析证实所表达的重组蛋白是MCGH.表达产物主要以包涵体的形式存在.重组蛋白变性、复性后,经NI-CHELATING SEPHAROSE亲和层析纯化,SDS-PAGE显示,纯化的MCGH纯度约为94%.纯化的MCGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(OREOCHROMIS MOSSAMBICUS),经4周处理后,实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38%和9.75%,体重增长率分别快23.42%和62.48%.经T检验统计分析表明,表达的重组MCGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P＜0.05).

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