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海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 杨成龙 1 ; 郭建春 2 ; 段瑞军 3 ;

作者机构： 1.贵州禾睦福种子有限公司

2.贵州省亚热带作物研究所

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词： 海马齿;甜菜碱醛脱氢酶;原核表达;酶活测定

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2016 年 42 卷 10 期

页码： 1569-1574

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。将海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到表达载体p ET-28a(+)上,获得重组载体p ET-Sp BADH并将其成功地转化到BL21(DE3)中得到重组工程菌,经IPTG诱导能高效表达55 k D目的蛋白,表达量可以达到301μg m L–1。酶学特征分析表明,该蛋白最适p H值为7.2,在偏碱条件下能维持较高的催化活性;Sp BADH蛋白对高温敏感,且温度对催化活性影响较大,超过55℃时酶活性只有20%,最适酶催化活性温度为37℃;而有机小分子醇类对酶的催化活性有保护作用,可以通过自身特征维持酶催化活性的微环境。

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