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根癌农杆菌介导柱花草炭疽菌遗传转化体系的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 胡彩平 1 ; 郑金龙 2 ; 高建明 3 ; 蔡志英 2 ; 黄贵修 2 ; 习金根 2 ; 张世清 3 ; 陈河龙 3 ; 易克贤 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 柱花草;炭疽菌;遗传转化

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2013 年 34 卷 06 期

页码: 1007-1012

收录情况: CSCD

摘要: 选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农杆菌AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农杆菌AGL-1介导柱花草炭疽菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢炭疽菌体系条件,使转化效率达到300~400个转化子/106个炭疽孢子,即根癌农杆菌AGL-1浓度OD600=0.8,炭疽菌分生孢子浓度为1×106个/mL,AS浓度为100μmol/L,诱导时间为6 h,共培养温度和时间分别为25℃和4 d。经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白。这为进一步开展炭疽菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究。

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