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绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 杨华 1 ; 周华倩 1 ; 黄新 1 ; 齐宇 2 ; 余乾 1 ; 张文喆 1 ; 杨永林 1 ; 侯扶琴 3 ;

作者机构: 1.新疆农垦科学院/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

2.石河子总场北泉镇农业发展服务中心

3.新疆西部牧业股份有限公司

关键词: 绵羊肺炎支原体;巢式PCR;检测方法

期刊名称: 安徽农业科学

ISSN:

年卷期: 2024 年 004 期

页码: 74-77

摘要: [目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。

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