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PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)中假阴性的探讨

文献类型： 中文期刊

作者： 闫冬春 1 ; 董双林 2 ; 黄倢 2 ;

作者机构： 1.中国海洋大学水产学院教育部水产养殖重点实验室

2.中国海洋大学水产学院教育部水产养殖重点实验室,鲁东大学生命科学学院烟台264025,中国海洋大学水产学院教育部水产养殖重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛266003,青岛266003,青岛266071

关键词： PCR;假阴性;白斑综合征病毒

期刊名称： 海洋与湖沼

ISSN： 0029-814X

年卷期： 2007 年 38 卷 02 期

页码： 52-56

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用PCR、核酸探针斑点杂交、组织切片等方法研究了PCR检测白斑综合征病毒(WSSV)中的假阴性问题。设计了一对引物用于PCR检测WSSV,PCR扩增的产物长度为235bp,检出极限为0.1pg WSSV DNA。结果表明,PCR检测15例攻毒螯虾鳃样品时出现一例阴性,而经10—106倍稀释后的样品却呈现阳性,推断PCR出现了假阴性。核酸探针斑点杂交及组织切片结果表明注射WSSV的螯虾鳃组织确已被严重感染,进一步证实了PCR假阴性。根据PCR的检出极限及模板稀释梯度,推算出该PCR能成功扩增的引物与模板浓度的比例范围约为2.4×105—2.4×1010。

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