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猪源艰难梭菌的分离鉴定与生物学特性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张悦 1 ; 艾伟诚 1 ; 王斐 1 ; 梁婉 2 ; 谢思思 1 ; 华琳 1 ; 李春辉 3 ; 彭忠 1 ; 吴斌 1 ;

作者机构: 1.华中农业大学动物医学院 农业微生物学国家重点实验室 生猪健康养殖协同创新中心

2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室

3.中南大学湘雅医院感染与控制中心

关键词: 艰难梭菌;分离鉴定;PCR检测;药敏试验;全基因组重测序

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2022 年 30 卷 002 期

页码: 27-33

收录情况: 北大核心

摘要: 为了了解我国猪源艰难梭菌(Clostridioides difficile,CD)的病原学及分子生物学特征,本研究收集湖北和广东地区疑似患有肠炎的病猪粪便样品,提取基因组DNA,利用已经报道的5重PCR方法对艰难梭菌的16S rDNA基因、毒素A的编码基因tcdA、毒素B的编码基因tcdB以及二元毒素编码基因cdtA和cdtB进行检测,同时采用厌氧培养法,对PCR检测毒素编码基因为阳性的粪便样品进行艰难梭菌的分离培养,并对所分离到的菌株进行药物敏感性测试和全基因组重测序.结果发现:本研究所采集到的97份粪便样品经PCR检测显示有80份样品为16S rDNA阳性,其中仅有2份样品为tcdA和tcdB阳性.从这两份样品中分离出一株tcdA和tcdB阳性的艰难梭菌,命名为HuB01.药敏试验发现,HuB01对头孢菌素(FOX)、氯霉素(CHL)、克林霉素(CLI)、氨苄西林(AMP)、头孢曲松钠(CRO)耐药,对莫西沙星(MXF)和万古霉素(VAN)表现出中度耐药,而对利福西明(RFX)、甲硝哒唑(MTZ)、非达霉素(FDX)敏感.全基因组重测序发现HuB01的全基因组大小为3.93 Mb,平均GC含量为28.31%,编码3691个蛋白基因及63个tRNA和10个rRNA;3691个基因中含有31个耐药基因和164个毒力相关基因.多序列位点分型(MLST)结果显示HuB01为ST11.由于目前国内对于艰难梭菌的研究大多集中在人医领域,因此本研究可为兽医领域艰难梭菌的相关研究奠定基础.

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