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ERV1-2B_SSc-LTR-EGFP报告系统的建立及猪克隆胚胎ERVs转录活性的监测

文献类型： 中文期刊

作者： 付博 1 ; 马红 1 ; 汪亮 1 ; 郭镇华 1 ; 王芳 1 ; 刘娣 1 ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院畜牧研究所

关键词： 体细胞核移植;长末端重复序列;绿色荧光蛋白报告系统;克隆;胚胎

期刊名称： 黑龙江动物繁殖

ISSN： 1005-2739

年卷期： 2025 年 33 卷 004 期

页码： 23-28

摘要： 体细胞核移植(SCNT)技术是生产转基因猪模型的核心技术,但猪克隆胚胎的发育能力仍然较低,其早期胚胎的内源性逆转录病毒(ERVs)的表达规律尚待深入研究.研究拟构建以猪基因组内源性逆转录病毒调控元件 ERV1-2B_SSc-LTR 驱动增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达的报告系统.通过脂质体转染获得阳性成纤维细胞株,进行体细胞核移植构建克隆胚胎,并在荧光显微镜下实时监测EGFP表达.结果表明:ERV1-2B_SSc-LTR-EGFP 报告系统成功构建;48%的克隆胚胎在 4细胞期表达 EGFP,表明该元件具有启动子活性.EGFP 阳性胚胎的囊胚形成率和细胞数显著高于阴性胚胎[(19.5±1.7)%vs.(14.8±0.5)%,(40.0±2.1)枚vs.(30.0±1.9)枚,P<0.05],提示该报告系统可用于实时监测 ERVs 活性并辅助评估克隆胚胎质量.

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