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旋毛虫14-3-3蛋白的定位及免疫效果分析

文献类型: 中文期刊

作者: 钱艳红 1 ; 温肖会 1 ; 宋帅 1 ; 牛瑞辉 1 ; 吕殿红 1 ; 郑博彬 1 ; 袁子国 2 ; 罗胜军 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

2.华南农业大学兽医学院

关键词: 旋毛虫;旋毛虫14-3-3蛋白;生物信息学;原核表达;抗原性分析;免疫保护

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2025 年 41 卷 008 期

页码: 123-132

收录情况: CSCD

摘要: 为了获得旋毛虫(T1)14-3-3蛋白,并对其生物学特征鉴定评估。使用相关网站及软件对旋毛虫14-3-3(Ts14-3-3)蛋白生物学信息进行分析预测;利用基因克隆和原核表达技术将Ts14-3-3与pET-28a进行重组,并获得重组Ts14-3-3(rTs14-3-3)蛋白,经Western blot鉴定其抗原性后,制备rTs14-3-3蛋白免疫血清,并采用qPCR技术和间接免疫荧光技术鉴定其在不同虫期的表达及肌幼虫中的定位;通过动物实验评估rTs14-3-3蛋白对旋毛虫感染小鼠肌肉中幼虫的减虫效果。成功制备出可溶性的r Ts14-3-3蛋白,大小约为33 kDa,并能够特异性识别猪旋毛虫阳性血清,制备的免疫血清效价高达1:512000,该蛋白在旋毛虫肌幼虫内部大量表达,基因在旋毛虫肠道感染期幼虫、成虫、肌幼虫中均有转录,对小鼠肌幼虫减虫率为55.2%。rTs14-3-3蛋白的反应原性和免疫原性良好,能够减少旋毛虫感染小鼠组织中的肌幼虫数量,具有作为血清学诊断和候选疫苗分子抗原的潜力。

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