文献类型： 中文期刊

作者： 孙菁晗 ¹ ; 向国庆 ² ; 宋帅 ² ; 温肖会 ² ; 吕殿红 ² ; 连聪 ² ; 顾有方 ¹ ; 罗胜军 ² ;

作者机构： 1.安徽科技学院动物科学学院动物营养调控与健康安徽省重点实验室

2.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

关键词： 猪日本乙型脑炎病毒;E蛋白;磁微粒;化学发光法

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 004 期

页码： 484-491

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为猪日本乙型脑炎病毒（Japanes encephalitis virus,JEV）提供一种更快捷便利的血清学检测方法，本试验建立了猪日本乙型脑炎病毒E蛋白（JEV-E）抗体磁微粒化学发光免疫分析法（CLIA）。以原核表达的JEV-E作为抗原包被磁微粒，与待检血清和碱性磷酸酶标记的Ig G抗体组成检测体系，定量检测猪血清中JEV抗体含量。结果显示，优化偶联条件后，最佳缓冲液pH值为5.0，最佳蛋白包被量为30μg/m L,5%BSA作为封闭剂，最适免疫磁珠保存液浓度为1 mg/m L；优化反应条件后，选择碱性磷酸酶抗体稀释度为1∶20 000，血清反应时间5 min，碱性磷酸酶反应时间10 min，底物反应时间7 min；建立的磁微粒化学发光法的阴阳性临界点判断标准为24.99 U；绘制受试者工作特征曲线（ROC），显示敏感性为99.5%，特异性为97.5%；该方法与猪细小病毒（PPV）、猪口蹄疫O型病毒（FMDV-O）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪链球菌（SS）、副猪嗜血杆菌（HPs）的阳性血清均无交叉反应；批间、批内变异系数均小于10%；敏感度与商品化试剂盒对比无显著性差异；与商品化试剂盒的符合率为98.27%。上述结果表明，该方法操作简单，试验流程方便快捷，可为JEV的快速诊断提供新的技术支持。