文献类型： 中文期刊

作者： 张雪寒 ¹ ; 张强 ¹ ; 张碧成 ¹ ; 汪伟 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 温立斌 ¹ ; 李彬 ¹ ; 周俊明 ¹ ; 何孔旺 ¹ ; 周萍 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 致病性大肠杆菌;紧密素;间接ELISA

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2016 年 29 卷 11 期

页码： 2738-2745

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在研制一种以紧密素为检测靶标的间接ELISA技术,检测血清中产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxigenic Escherichia coli,STEC)的抗体水平。根据紧密素27个亚型的N端保守序列,体外表达390~543 aa片段制备包被抗原,通过敏感性、特异性、重复性和稳定性实验,建立检测STEC的抗体的间接EIISA方法。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度3 ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-兔抗羊Ig G、HRP-兔抗牛Ig G的工作浓度均为1∶15000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间10min,用于牛、羊疫苗抗体检测或者STEC大肠杆菌感染的监测。