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犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 毕振威 1 ; 夏兴霞 1 ; 王晓丽 1 ; 诸玉梅 1 ; 董晨红 1 ; 贾红 2 ; 朱瑞良 3 ; 王永山 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

3.山东农业大学动物科技学院

关键词: 犬瘟热病毒;杂交瘤细胞株;单克隆抗体;夹心ELISA

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2013 年 35 卷 08 期

页码: 635-639

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立方便快捷的犬瘟热病毒(CDV)检测方法,本实验应用杂交瘤细胞融合技术,建立了4株分泌抗CDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F7、H4和G12。相加ELISA试验显示4株MAb作用于CDV不同的抗原表位。选取相加指数较高的两株MAb G12和A2分别作为捕获抗体和酶标检测抗体,建立检测CDV的夹心ELISA检测方法,并对实验条件进行了优化。结果显示,该方法与犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒1型、犬冠状病毒等犬类病毒无交叉反应,敏感度为5μg/mL,变异系数小于6%。利用该方法与RT-PCR方法同时检测57份临床样品,两种方法的符合率为100%。本实验建立的MAb夹心ELISA方法具有特异、敏感、方便快捷等优点,适用于大批量临床样品检测。

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