文献类型： 中文期刊

作者： 张昕泽 ¹ ; 蒲睿思 ¹ ; 牛锦璐 ¹ ; 黄文洁 ¹ ; 晏石娟 ¹ ; 张文洋 ¹ ; 吴绍文 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院农业生物基因研究中心/猪禽种业全国重点实验室

关键词： 黄曲霉;Zn(Ⅱ)₂Cys₆转录因子;黄曲霉毒素;B8N6S4;致病性

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2025 年 52 卷 005 期

页码： 54-63

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】明确黄曲霉（Aspergillus flavus）中Zn（Ⅱ）₂Cys₆锌簇转录因子B8N6S4的功能，解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁，AFB₁）合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺失突变体菌株（ΔB8N6S4），比较ΔB8N6S4突变体和野生型（WT）菌株在生长发育、毒素合成及侵染能力方面的差异。【结果】生物信息学分析显示，B8N6S4含有典型的GAL4样Zn（Ⅱ）₂Cys₆ DNA结合域和真菌特异性转录因子结构域。系统发育分析表明，B8N6S4与黄曲霉毒素高产菌株A.minisclerotigenes的同源蛋白KAB8271990.1具有最高序列相似性（97.99%）。利用同源重组方法，成功构建2个黄曲霉B8N6S4基因敲除菌株ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2。与野生型相比，2个ΔB8N6S4突变体在PDA培养基上的菌丝生长速率无显著变化，但分生孢子产量显著降低至7.5×10～6、8.0×10～6个/mL，较WT菌株的4.4×10～7 个/mL分别降低83%和82%。且2个ΔB8N6S4突变体的菌核形成能力显著提高，其菌核数量达767、836个，约为WT菌株的2倍。薄层色谱分析结果显示，与WT菌株相比，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体毒素合成能力增强，分别增加约78%和104%。此外，玉米籽粒侵染试验表明，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体的侵染能力与WT菌株无显著差异，侵染后的产孢能力与WT菌株相当，但在玉米基质上的AFB?产量显著增加，分别约为WT菌株的5.2倍和3.9倍。【结论】黄曲霉Zn（Ⅱ）₂Cys₆转录因子B8N6S4正调控黄曲霉的无性产孢、负调控菌核形成，同时抑制AFB?的生物合成。B8N6S4基因缺失不直接影响黄曲霉的致病力，但显著增强其毒素产生能力。本研究首次揭示B8N6S4转录因子在黄曲霉毒素合成网络中的调控作用，可为靶向阻断毒素合成的防控策略提供新靶点。