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香蕉MaSIP2-2基因的克隆、序列分析及表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 许奕 1 ; 金志强 1 ; 徐碧玉 2 ; 胡伟 2 ; 黄东梅 1 ; 宋顺 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院海口实验站海南省香蕉遗传改良重点实验室

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词： 水通道蛋白;SIP;香蕉;生物信息学;表达载体

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2017 年 33 卷 05 期

页码： 17-23

摘要： 为进一步研究植物中水通道蛋白的表达调控以及作用机制,从香蕉中克隆了一个水通道蛋白(AQP)基因MaSIP2-2,同时运用生物学软件对该基因进行序列分析,并且构建了MaSIP2-2的植物表达载体。序列分析表明,该基因存在一个完整的开放阅读框(ORF)780 bp,编码260个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,MaSIP2-2所编码的蛋白与其他植物中SIP编码的蛋白具有较高的一致性。与马来西亚野生香蕉、油棕、甜橙、海枣、梅、可可、菠萝的AQP编码的氨基酸序列的同源性分别为98%、62%、53%、52%、57%、55%、59%。MaSIP2-2编码的蛋白质分子量为28800.62 Da,理论等电点p I为9.13,其亲水性氨基酸均匀分布在整个肽链中,多于疏水性氨基酸。通过PCR和酶切反应鉴定,成功构建该基因的表达载体。研究结果表明MaSIP2-2是水通道蛋白中小的内在蛋白的一个成员,为后续对其进行功能验证奠定基础。

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