文献类型： 中文期刊
作者： 潘群兴 1 ; 何孔旺 1 ; 段治涛 2 ; 黄克和 3 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所
2.浙江省宁波市镇海区农业局
3.南京农业大学动物医学院
关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2基因;表达;间接ELISA
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2007 年 23 卷 06 期
页码： 94-98
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计特异性引物,进行PCR反应,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达。表达产物经His-Bind蛋白纯化试剂盒纯化,平均浓度为1.10 mg/ml。以1.8μg/ml蛋白包被酶标板,建立ELISA检测方法。建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较,两者检测结果符合率达85%以上。用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10~160日龄猪群血清样品进行了检测,检测结果显示母猪阳性率为81.4%,仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低,之后由于受PCV-2的感染,阳性率逐渐升高。本试验建立的ELISA方法,具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测。
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