文献类型： 中文期刊
作者： 钱雯娴 1 ; 肖琦 2 ; 赵霞玲 1 ; 温立斌 2 ; 索朗斯珠 1 ; 何孔旺 2 ;
作者机构： 1.西藏农牧学院动物科学学院西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室
2.江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室
关键词： 猪圆环病毒2型;多重荧光定量PCR;检测;基因型
期刊名称： 中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2023 年 31 卷 004 期
页码： 74-81
摘要： 为建立一种检测猪圆环病毒2型多重实时荧光定量PCR方法,可对3种基因型PCV2a、PCV2b、PCV2d检出并分型.针对3种基因型ORF2基因,在保守序列设计通用引物并分别设计特异TaqMan探针,3条探针分别标记NED、JOE和FAM荧光报告基团,建立多重实时荧光定量PCR反应体系,检测其灵敏性、重复性和特异性.经条件优化多重荧光定量PCR的反应体系为30 μL,各型探针加样为0.6 μL,退火温度为60℃;最低检测值为PCV2a 100 copies/μL、PCV2b 57 copies/μL和PCV2d 100 copies/μL,而且该方法对猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等其他6种猪源主要病毒核酸检测均为阴性,具有良好的特异性;组内和组间的检测变异系数均小于等于3.6%;通过检测218份阳性样本,结果表明该方法能快速检测猪圆环病毒2型三种主要流行型并同时分型,为PCV2快速分型的诊断提供新方法.
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