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绿针假单胞菌YL-1抗细菌活性相关基因的克隆和分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘邮洲 1 ; Shi-En Lu 2 ; Sonya M.Baird 2 ; 乔俊卿 1 ; 杜艳 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

2.美国密西西比州立大学植物病理系

关键词: 绿针假单胞菌YL-1;突变株;抗细菌活性;质粒拯救;克隆

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2015 年 45 卷 03 期

页码: 307-316

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 绿针假单胞菌YL-1对植物多种重要病原细菌和病原真菌有较强的抑制作用。采用转座子插入突变技术电转化绿针假单胞菌YL-1,构建随机插入突变体库。通过平板抑菌试验从突变体库中筛选对3种病原细菌荚壳伯克霍尔德菌Burkholderia glumae、解淀粉欧文氏菌Erwinia amylovora和胡萝卜果胶杆菌Pectobacterium carotovora抑菌效果显著下降的突变体,并采用PCR和Southern Blot验证转座子是否成功插入到YL-1染色体基因组上。利用质粒拯救技术克隆转座子插入位点基因、测序和生物信息学分析。结果表明:本研究成功构建了绿针假单胞菌YL-1随机插入突变体库,筛选出7株对3种病原细菌抑制效果明显下降的突变体,但其对立枯丝核菌的抑制效果与野生型菌株YL-1相同;PCR和Southern Blot试验结果表明绿针假单胞菌YL-1的7株突变体均是单拷贝;克隆到7个突变体插入位点的基因序列并测序,生物信息学分析结果表明其中6个突变位点是嗜铁素合成基因簇,1个突变位点是蛋白分泌基因sec Y。

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