文献类型： 中文期刊

作者： 申慧 ¹ ; 张英萍 ² ; 王利华 ² ; 沙航 ² ; 王咏星 ¹ ; 邹桂伟 ² ; 梁宏伟 ² ;

作者机构： 1.新疆大学生命科学与技术学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 中华鳖(Pelodiscus sinensis);促性腺激素释放激素;基因克隆;基因表达

期刊名称： 淡水渔业

ISSN： 1000-6907

年卷期： 2019 年 49 卷 04 期

页码： 16-21

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了解GnRH基因在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性腺和胚胎发育过程中的表达特征,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从中华鳖全脑中获得与生长生殖调控密切相关的GnRH 1基因全长cDNA,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测GnRH 1在成鳖不同组织和胚胎发育时期的表达水平。结果显示:中华鳖GnRH 1基因cDNA全长546 bp,其中5′非编码区(5′UTR)99 bp,3′非编码区(3′UTR)168 bp,开放阅读框(ORF)279 bp,编码92个氨基酸,分子质量为10.23 ku,理论等电点pI为5.65,具有N端信号肽(1～23 aa)、核心十肽区域(24～33 aa)、断裂位点GKR(34～36 aa)及相关肽区域(37～92 aa),符合GnRH蛋白典型结构特征。系统进化树结果显示,中华鳖GnRH 1基因和绿海龟(Chelonia mydas)、墨西哥箱龟(Terrapene carolina mexicana)及西部锦龟(Chrysemys picta bellii)GnRH 1基因聚为一支。qRT-PCR结果表明,GnRH 1基因在中华鳖雌雄个体的8个组织中均有表达,在脑和性腺组织中高表达,且具有性别差异,雄性中华鳖中的表达显著高于雌性(P<0.05);在10个胚胎发育时期均表达,且随发育时间的后移,表达量显著增加,在第16期达到峰值。GnRH 1基因可能在中华鳖生长及性腺分化中具有重要作用。