文献类型： 中文期刊

作者： 张敏霞 ¹ ; 池周颖 ¹ ; 瞿孝云 ¹ ; 刘杨 ¹ ; 曾庆航 ¹ ; 李昌 ¹ ; 廖明 ¹ ;

作者机构： 1.华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室;广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室;军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元

关键词： chTM9SF2;克隆;序列分析;表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 43 卷 011 期

页码： 2298-2307

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸡九次跨膜超家族成员2(chicken transmembrane 9 superfamily 2,chTM9SF2)预测序列设计引物,以原代鸡胚成纤维细胞CEF、鸡成纤维细胞系DF1和鸡肝癌细胞LMH的cDNA为模板,采用PCR方法扩增chTM9SF2编码序列,并利用MEGA 7.0、Clustal W、SWISS-MODEL等生物信息学工具对鸡、鸭、人、鼠等不同物种来源的九次跨膜超家族成员2(transmembrane 9 superfamily 2,TM9SF2)进行遗传进化、同源性、结构域及结构模拟等分析;进而通过构建真核表达质粒,利用Western blot、激光共聚焦显微镜探究chTM9SF2的表达和亚细胞定位.结果显示,分别在3类细胞中均可成功获得编码序列一致的chTM9SF2基因,与禽类的同源性最高,且高度保守;该基因能够在DF-1细胞中表达,且主要定位于晚期内体或溶酶体膜.结果表明,成功扩增获得chTM9SF2基因,并在DF-1细胞成功表达,分析其定位于晚期内体或溶酶体膜,为进一步研究chTM9SF2的生理功能及在病原感染中的作用奠定了基础.