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豌豆ISSR-PCR反应体系的建立和优化

文献类型： 中文期刊

作者： 曾亮 1 ; 李敏权 1 ; 杨晓明 2 ; 赵丽娟 2 ; 杨发荣 2 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学草业学院

2.甘肃省农业科学院

关键词： 豌豆;ISSR;PCR反应体系;优化

期刊名称： 草地学报

ISSN： 1007-0435

年卷期： 2012 年 20 卷 03 期

页码： 154-157

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以豌豆(Pisum sativum L.)DNA为材料,对影响其ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Taq酶量、退火温度)进行优化,最终确定了豌豆ISSR-PCR反应的最佳体系(20μL)为:15ng模板DNA,0.15mmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1ISSR引物,1UTaq DNA聚合酶,引物842号的最适退火温度为50℃。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行豌豆属种质资源的遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。

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