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草菇基因枪法遗传转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 郭丽琼 1 ; 杨飞芸 1 ; 熊盛 2 ; 林俊芳 1 ;

作者机构： 1.华南农业大学食品学院生物工程系

2.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 草菇;基因枪;遗传转化;gus基因

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2005 年 32 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 草菇菌株V1308对潮霉素、卡那霉素、遗传霉素、膦丝菌素的抗性测验结果表明,该菌株对潮霉素敏感,而对其它三者不敏感。进一步测定结果显示,潮霉素的最低筛选浓度在PDSA固体培养基上为75μg·mL-1,在PDSB液体培养基中为50μg·mL-1。以含有35S启动子、gus报告基因、潮霉素抗性基因的质粒pCAMBIA1301为表达载体,采用基因枪法对草菇菌丝体进行遗传转化。结果表明,基因枪的最佳轰击参数为:氦气压力1100Psi,真空压力87·88kPa,靶距离6cm,轰击次数1次。Southern杂交结果显示,gus基因已整合进V1308基因组中。GUS组织化学检测结果证明,gus基因在V1308菌丝体中获得了表达。草菇出菇试验结果显示,转基因草菇和对照都能正常形成子实体,子实体组织分离长出的菌丝体经GUS组织化学检测,证明了外源基因gus能够在转基因草菇的菌丝体中稳定表达。

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