文献类型: 中文期刊
作者: 王丽 1 ; 王振东 1 ; 乔奇 2 ; 秦艳红 2 ; 张德胜 2 ; 田雨婷 2 ; 王爽 2 ; 张立军 1 ; 张振臣 2 ;
作者机构: 1.沈阳农业大学农学院
2.河南省农业科学院植物保护研究所
关键词: 甘薯褪绿矮化病毒西非株系;荧光探针;实时荧光定量PCR
期刊名称: 植物病理学报
ISSN: 0412-0914
年卷期: 2014 年 44 卷 05 期
页码: 461-468
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 依据Gen Bank中登录的甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)西非株系(WA)的核苷酸序列,分别设计两对特异性引物和一条Taq Man探针。以SPCSV-WA外壳蛋白(cp)基因的重组质粒为阳性标准质粒绘制标准曲线,通过优化反应体系和反应条件,建立了SPCSV-WA的实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明,该方法只能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.239和1,扩增效率为103.568%。最低可检测到约3.31 copies/μL的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高1 000倍。本研究建立的SPCSV实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPCSV的早期预警和流行学研究提供了技术手段。
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