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甜瓜黄斑病毒外壳蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及其应用

文献类型: 中文期刊

作者: 曾蓉 1 ; 徐丽慧 1 ; 高士刚 1 ; 戴富明 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院生态环境保护研究所/上海市设施园艺重点实验室

关键词: MYSV;抗血清;免疫捕获PCR;western blot;斑点ELISA

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2017 年 47 卷 05 期

页码: 647-653

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究将甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)外壳蛋白基因克隆到原核表达载体pET32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达该蛋白,免疫家兔制备其多克隆抗体。本文通过多克隆抗体,建立了间接ELISA(ID-ELISA)、免疫捕获PCR(IC-RT-PCR)、Western blot及dot-ELISA的MYSV检测方法,以上各种方法均能特异的检测MYSV。检测结果表明:ID-ELISA方法检测效价大于1∶6 400;Western blot检测灵敏度达到1∶320(W/V,g·mL-1);Dot-ELISA检测灵敏度达到1∶80(W/V,g·mL-1),且用牙签等非实验室工具便能检测该病毒,能高效地应用于田间样品的检测。

  • 相关文献

[1]One-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay for rapid detection of melon yellow spot virus. Zeng, Rong,Xu, Li-hui,Gao, Shi-gang,Dai, Fu-ming,Ni, Xiu-hong,Chen, Chun-lei,Chen, Jian-cai.

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