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狗牙根SRAP-PCR反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 黄春琼 1 ; 周少云 1 ; 刘国道 1 ; 白昌军 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

关键词: 狗牙根;SRAP-PCR;单因子试验;正交设计;体系优化

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2009 年 28 卷 05 期

页码: 153-161

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究以狗牙根幼叶为为试材,采用单因子试验和正交设计试验2种方法,对SRAP-PCR反应体系进行优化试验,结果表明狗牙根25μLSRAP-PCR最佳反应体系为:1.5mmol/LMg2+、0.25mmol/LdNTP、0.4μmol/L引物、1.5UTaq酶和80ng模板DNA,最佳退火温度为50.6℃。运用该体系对30份狗牙根种质进行验证,电泳结果显示扩增条带清晰、多态性高,证明该体系稳定可靠,这一优化体系的建立为今后利用SRAP标记技术对狗牙根进行分子生物学研究提供了帮助。

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