文献类型： 中文期刊

作者： 万春和 ¹ ; 潘异哲 ¹ ; 傅秋玲 ¹ ; 陈珍 ¹ ; 陈翠腾 ¹ ; 傅光华 ¹ ; 陈红梅 ¹ ; 程龙飞 ¹ ; 施少华 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

关键词： 禽坦布苏病毒;非结构蛋白NS1;表达;间接ELISA

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2015 年 30 卷 11 期

页码： 1027-1031

摘要： 对禽坦布苏病毒非结构蛋白NS1基因进行原核表达,并进行生物学活性鉴定。将表达成功具有生物学活性的重组蛋白经纯化后,作为抗原包被ELISA平板,通过条件优化,建立检测禽坦布苏病毒血清学检测方法。结果表明,表达的NS1重组蛋白大小约为60kd,该蛋白经Western blot检测具有良好的生物学活性。将该重组蛋白纯化后包被ELISA板建立检测禽坦布苏病毒血清学间接ELISA方法,该方法优化后的参数为2.5μg·mL~(-1)包被ELISA板;一抗(鸭血清)血清稀释度为1∶100;酶标二抗为1∶3 000。本研究建立的方法特异性强,批内和批间重复性较好。用建立的间接ELISA方法对坦布苏病毒灭活苗免疫鸭血清和自然感染鸭血清进行检测,结果表明,本研究建立的NS1-ELISA不能用于区分禽坦布苏自然感染和疫苗免疫血清的鉴别诊断。