文献类型： 中文期刊

作者： 崔喜艳 ¹ ; 赵吉元 ¹ ; 胡广宇 ¹ ; 窦瑶 ² ; 刘相国 ³ ; 韩四平 ³ ;

作者机构： 1.吉林农业大学生命科学学院

2.吉林大学生命科学学院

3.吉林省农业科学院农业生物技术研究所

关键词： AGPase-bt2;GPN1;双分子荧光互补技术;蛋白质互作

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2015 年 43 卷 06 期

页码： 99-104

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-AGPasebt2、326-CYNEE-GPN1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;携带有共转化基因的烟草叶肉细胞在激光共聚焦显微镜下观察到明显的黄色荧光现象,且黄色荧光与叶绿体自发的红色荧光位置重合。【结论】AGPase-bt2与GPN1在植物细胞中真实地存在蛋白互作。