文献类型: 中文期刊
作者: 刘禹彤 1 ; 杨冠华 1 ; 张菊 2 ; 李玉鹏 3 ; 乔家运 1 ; 李海花 4 ;
作者机构: 1.天津师范大学生命科学学院
2.天津市宝坻区农业综合行政执法支队
3.天津市农业科学院畜牧兽医研究所
4.天津农学院动物科学与动物医学学院
关键词: 肉桂醛;富马酸;猪肠上皮细胞;产肠毒素型大肠杆菌;氧化应激
期刊名称: 动物营养学报
ISSN: 1006-267X
年卷期: 2024 年 003 期
页码: 1904-1915
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本试验旨在研究富马酸(FA)与肉桂醛(CA)联用调节产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)K88诱导猪肠上皮细胞IPEC-J2氧化应激的分子机制。试验选用IPEC-J2细胞建立氧化损伤模型,用不同浓度FA和CA处理IPEC-J2细胞12和24 h,并用CCK-8法检测细胞活力,确定最佳处理浓度和时间;以最佳处理浓度的FA和CA预处理细胞,ETEC K88感染细胞3、6、12和24 h,检测其活菌黏附率,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子含量和抗氧化指标,并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定热休克蛋白70(Hsp70)和核因子-κB(NF-κB)信号通路相关基因mRNA相对表达量。结果表明:1) FA和CA的最佳处理浓度分别为1.00 mg/mL和1.00μL/mL,最适培养时间为12 h。2)添加FA和CA可有效抑制ETEC K88黏附IPEC-J2细胞,当ETEC K88感染细胞3 h时其黏附率显著下降(P<0.05),6、12和24 h时极显著下降(P<0.01)。3)添加FA和CA可极显著降低ETEC K88感染细胞中促炎性细胞因子白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P<0.01),极显著提高抗炎性细胞因子白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)含量(P<0.01)。4) ETEC K88通过激活NF-κB信号通路诱导IPEC-J2细胞氧化损伤,添加FA和CA可上调Hsp70 mRNA相对表达量并抑制NF-κB信号通路缓解IPEC-J2细胞氧化应激。5)添加FA和CA可显著提高ETEC K88感染细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P <0.05),极显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.01)。综上所述,FA与CA联用可调节炎性细胞因子和氧化应激蛋白平衡并抑制ETEC K88黏附IPEC-J2细胞,其可能是通过上调Hsp70抑制NF-κB信号通路,增强IPEC-J2细胞的抗氧化和抗炎能力,从而缓解ETEC K88诱导的IPEC-J2细胞氧化应激。
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