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猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的克隆、表达及纯化

文献类型: 中文期刊

作者: 王秋霞 1 ; 张改平 1 ; 乔松林 1 ; 鲁琨 1 ; 王选年 1 ; 王丽 1 ; 宁长申 2 ; 张龙现 2 ; 菅复春 2 ; 张丽萍 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室

2.河南农业大学牧医工程学院

关键词: 猪囊尾蚴;Ts8B2基因;克隆;表达;纯化

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2008 年 30 卷 12 期

页码: 929-934

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2蛋白基因,测序结果表明:序列长度为270bp,包含258bp的编码区,编码85个氨基酸,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为99%;将该基因成熟肽部分亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,进行SDS-PAGE初步分析,在34ku位置有1条蛋白条带,与预期结果一致。通过GST亲和纯化获得了较高纯度的重组融合蛋白,Western blot结果表明,纯化后的重组融合蛋白可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应。排泄分泌抗原Ts8B2的成功表达、纯化为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。

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