文献类型： 中文期刊

作者： 龚芳 ¹ ; 席俊 ¹ ; 李青梅 ² ; 职爱民 ² ; 胡骁飞 ² ; 柴书军 ² ; 张改平 ² ; 陆启玉 ¹ ;

作者机构： 1.河南工业大学粮油食品学院

2.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室

关键词： 2,4-D;单克隆抗体;杂交瘤;特异性

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2012 年 21 卷 11 期

页码： 24-28

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 制备抗2,4-D高敏感性和高特异性的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用EDC法将BSA、OVA和2,4-D偶联制成免疫原和包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,用免疫原免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫,用间接ELISA和阻断ELISA选择高效价、高敏感性的小鼠进行细胞融合;应用杂交瘤细胞技术建立分泌抗2,4-D单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生法制备腹水,并对其效价、敏感性、亚型和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,融合后筛选出3株特异性高的杂交瘤细胞1F11、2A12、2G12,单抗亚型均为IgG1型,效价为1∶2 560～1∶5 120,对2,4-D的IC50分别为0.801、1.332、1.564μg/L,亲和常数(Ka)分别为2.174×1011、3.21×1010和4.36×1010 L/mg,与其他竞争物的交叉反应率均小于0.03%。说明成功获得高敏感性、高亲和力和高特异性的2,4-D mAb,为2,4-二氯苯氧乙酸残留免疫学快速检测方法的建立奠定基础。