文献类型： 中文期刊

作者： 马红 ¹ ; 刘宇 ¹ ; 汪亮 ¹ ; 王文涛 ¹ ; 吴赛辉 ¹ ; 何鑫淼 ¹ ; 刘娣 ¹ ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院畜牧研究所

关键词： 民猪;外周血单核细胞;环境温度;实时荧光定量PCR;内参基因

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 3426-3433

收录情况： 北大核心

摘要： 民猪是能够适应东北地区寒冷环境的地方猪种,但目前对其环境适应性相关基因的研究较少,也没有确定适合此研究所需的实时荧光定量PCR的内参基因。因此,本试验通过研究常用的12个内参基因(B2M、ACTB、RPL11、RPL4、YWHAZ、GAPDH、HPRT1、SDHA、HMBS、IDH3B、TUBB2B和TBP1)在不同环境温度下民猪外周血单核细胞中的表达稳定性,旨在确定合适的内参基因进行相关研究。分别在-25、5、10和30℃采集3头民猪耳静脉血分离出单核细胞,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper 3种软件分析12个候选内参基因的Ct值,筛选出表达稳定的基因作为内参基因。经geNorm和NormFinder计算获得各候选基因的M值发现,12个候选基因的表达均相对稳定,而BestKeeper的分析则显示ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1、TBP1、YWHAZ基因的SD值均<1,可用作本研究条件下的内参基因,而另外6个基因SD值则>1,不符合作为内参基因的标准。综合3种分析的结果,在本研究条件下,TBP1基因的稳定性最高,ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和YWHAZ基因也符合作为内参基因的标准,都可研究在不同环境温度下民猪外周血单核细胞中基因表达时作为内参基因。