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抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王自良 1 ; 张改平 2 ; 杨艳艳 2 ; 张海棠 1 ; 王选年 1 ; 邓瑞广 2 ;

作者机构: 1.河南科技学院动物科学学院

2.河南省动物免疫学重点实验室

关键词: 苯巴比妥;半抗原;人工抗原;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2006 年 20 卷 04 期

页码: 66+85-89

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。

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