文献类型： 中文期刊

作者： 李彬彬 ¹ ; 邓瑞广 ² ; 侯玉泽 ² ; 张改平 ² ; 王自良 ² ; 赵东 ² ; 刘庆堂 ² ; 柴书军 ² ;

作者机构： 1.河南省动物免疫学重点实验室

2.河南省动物免疫学重点实验室;河南科技大学食品与工程学院

关键词： 二氟沙星;人工免疫原;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2008 年 24 卷 10 期

页码： 51-56

收录情况： 北大核心

摘要： 采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(O-VA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA。采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAb),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2×101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28×105、1:6.4×104。同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol。亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应。通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验。