文献类型： 中文期刊

作者： 黄海 ¹ ; 谢蓓 ¹ ; 于瑞嵩 ² ; 刘惠莉 ² ; 张德福 ² ; 曹祥荣 ¹ ; 李震 ² ;

作者机构： 1.南京师范大学生命科学学院

2.上海市农业遗传育种重点实验室

关键词： 猪IFNα;巴斯德毕赤酵母;基因重组;分泌表达

期刊名称： 遗传

ISSN： 0253-9772

年卷期： 2005 年 27 卷 02 期

页码： 215-220

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 巴斯德毕赤酵母载体质粒 pPICZαA含有强启动子 PAOXⅠ和α MF信号肽序列,构建猪 IFNα基因的重组质粒pPICZαA IFNα,并转入E .coli JM109中,得到转猪IFNα基因工程菌,经酶切鉴定克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为猪 IFNα基因。通过电击将经 SacⅠ酶切后线性化的 pPICZαA IFNα质粒转化到巴斯德毕赤酵母 KM71中。SDS PAGE和Western blot鉴定表达产物的结果表明,分泌于胞外的猪 IFNα蛋白分子量比猪IFNα理论值分子量稍大,估计是糖基化的原因。表达的蛋白可发生正确的抗原 抗体反应,表达量为 0.45 mg/mL。将蛋白表达上清经细胞毒性实验检测表达产物的抗病毒活性为2.1×104 IU/mL。