文献类型： 中文期刊

作者： 曹德玉 ¹ ; 郭淼 ² ; 贾国超 ³ ; 胡骁飞 ³ ; 王方雨 ³ ; 刘珍 ³ ; 杨幸东 ³ ; 张改平 ³ ;

作者机构： 1.周口职业技术学院生物工程系

2.南阳农业职业学院农学系

3.河南省农业科学院

关键词： 司帕沙星;人工抗原;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称： 中国乳品工业

ISSN： 1001-2230

年卷期： 2016 年 44 卷 05 期

页码： 18-21

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备高灵敏、高特异性的司帕沙星(SPFX)单克隆抗体,鉴定免疫学特性。采用蛋白质偶联技术DCC法制备免疫抗原SPFX-BSA和包被抗原SPFX-OVA,免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA和阻断ELISA选出产生优质多克隆抗体的的小鼠进行细胞融合,经过多次亚克隆筛选出分泌高敏感的特异性抗SPFX单克隆抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备抗SPFX的单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明,间接ELISA检测显示免疫的6只小鼠效价均达1.28:10~4以上,融合后筛选出四株杂交瘤细胞株4H4-C8,4H4-C4,4H4-B1和4H4-E9;其细胞上清效价分别为1:1.4×10~3,1:8.0×10~2,1:5.0×10~2,1:6.7×10~2;4H4-C8株腹水效价为1:2.6×10~6,抗SPFX的单克隆抗体对SPFX的IC_(50)为31μg/L,且具有较好的特异性。本研究成功合成SPFX人工抗原,制备出优质的单克隆抗体,为SPFX免疫学快速检测方法的建立奠定坚实的基础。