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三种鸡源致病性细菌多重PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 李婷 1 ; 周景瑞 1 ; 姜玲玲 1 ; 杨伟 1 ; 杨莉 1 ; 徐景峨 1 ; 邬能勇 2 ; 余波 1 ;

作者机构: 1.贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

2.剑河县岑松苗格里帮扶种养殖专业合作社

关键词: 沙门菌;大肠杆菌;巴氏杆菌;多重PCR

期刊名称: 上海畜牧兽医通讯

ISSN: 1000-7725

年卷期: 2020 年 004 期

页码: 2-5

摘要: 为建立快速同步鉴别鸡源巴氏杆菌、大肠杆菌和沙门菌的多重PCR检测方法,参考GenBank中大肠杆菌Pho A基因序列、沙门菌inv A基因序列和巴氏杆菌kmt 1基因序列,设计了3对特异性引物.通过优化引物浓度及退火温度建立多重PCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验.结果显示,该方法对金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌、鸡支原体及禽白血病等核酸扩增为阴性;对大肠杆菌、沙门菌和巴氏杆菌3种核酸最低检测量分别为12.5 pg/mL、15.0 pg/mL、50.0 pg/mL;多次重复性试验结果一致.结果表明,建立的多重PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,为鉴别诊断这3种致病细菌提供了快速、便捷的检测方法.

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