文献类型： 中文期刊

作者： 陆健 ¹ ; 张世芳 ² ; 张小宁 ² ; 刘佳森 ² ; 李碧春 ¹ ; 赵福平 ² ; 张莉 ² ; 魏彩虹 ² ; 杜立新 ² ;

作者机构： 1.扬州大学动物科学与技术学院

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所国家畜禽分子遗传育种中心

关键词： myostatin基因;山羊胎儿成纤维细胞;慢病毒载体;RNA干扰

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2012 年 39 卷 09 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心

摘要： myostatin基因是肌肉生长和发育的关键负调控因子之一,该基因突变或失活的物种都呈现肌肉增大的双肌表型,暗示在家畜中使该基因失活可以增加其产肉量。为了进一步揭示myostatin在山羊胎儿成纤维细胞中的生物学功能以及制备可有效失活myostatin基因的工具,将筛选的myostatin基因潜在RNA干扰靶位点连接到慢病毒干扰载体的转移质粒中,构建慢病毒介导的RNA干扰载体,验证其干扰效果。结果表明,干扰序列与转移质粒连接正确,成功构建myostatin基因慢病毒干扰载体,慢病毒三质粒共转293T细胞,获得的慢病毒颗粒可高效转染山羊胎儿成纤维细胞,Real-time PCR检测发现慢病毒干扰载体Lv322有效减少山羊胎儿成纤维细胞中myostatin基因mRNA 75%的表达(P<0.01),Western blotting检测显示myostatin蛋白则有效降低了94%(P<0.01)。本试验为研究myostatin基因的功能及制备失活转基因动物提供有效工具以及理论基础。