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氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究

文献类型： 中文期刊

作者： 陆彦 1 ; 吴国娟 1 ; 王金洛 2 ; 徐福洲 2 ;

作者机构： 1.北京农学院

2.北京市农林科学院

关键词： 氨苄青霉素;单克隆抗体;ELISA

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2005 年 37 卷 10 期

页码： 1-4

收录情况： 北大核心

摘要： 利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。

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