文献类型： 中文期刊
作者： 戴剑 1 ; 洪德林 2 ; 张大栋 2 ; 吴燕 2 ;
作者机构： 1.南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室
2.南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室;江苏省农业科学院粮食作物所;Department of Agronomy,Kansas State University,Manhattan,KS 66506,USA
关键词： 小麦;DNA;提取方法
期刊名称： 麦类作物学报
ISSN： 1009-1041
年卷期： 2011 年 31 卷 03 期
页码： 437-442
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： DNA提取技术是分子实验的一个重要步骤,快速、高效的植物DNA提取方法是样品需要量大的分子实验的一个关键技术。本实验通过改进传统的DNA提取方法,使用96孔联体试管板,而不是单个离心试管,对叶片进行冷冻干燥后粉碎,无需使用液氮。在实验过程中,使用排枪操作,CTAB法提取DNA。以小麦为例,依据该方法提取幼苗叶片DNA,并选取6对引物对DNA样品进行PCR扩增,使用ABI PRISM3730 DNA分析仪对扩增产物进行分析,以检测提取的DNA质量。结果表明,本实验的DNA提取方法所得到的PCR扩增条带均有较高的强度。在6对实验引物的扩增结果中,扩增条带强度最好的引物有98%的样品在6935~16786 RFU(Relative Fluorescence Unit)之间;扩增条带强度较低的引物有93%的样品在532~1111 RFU之间;在所有的PCR扩增反应中,最低PCR扩增条带强度为205 RFU,缺带样品数量平均只有0.8%。按照本实验的方法操作,每人每天可提取上千个样品的DNA。因此,该DNA提取方法是一种高效、快速、能获得高质量DNA的有效方法。
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